بينما ينتشر الفيروس
سعيا وراء إمكانات ينابيعنا الحارة للرعاية الصحية ،
تجارب تعطيل الإنفلونزا باستخدام الينابيع الساخنة
مارس هذا العام عقدت في الحادي عشر.
أ) أضف 0.01 مل من Ruflox إلى 0.99 مل من الماء النقي لتحضير محلول مخفف 100 ضعف.
بالإضافة إلى ذلك ، تمت إضافة 0.15 مل من محلول Ruflox المخفف 100 مرة إلى 2.85 مل من الماء النقي لتكوين محلول مخفف بمقدار 2000 مرة.
b) قم بتوزيع 1.08 مل من محلول Ruflox 2000-fold المخفف في أنبوب ، وخلط 0.12 مل من محلول فيروس الأنفلونزا المحضر عند 5-10 x 10 pfu / mL باستخدام محلول الفوسفات المؤقت (PBS). ، و تم استخدام المقلوب كمحلول اختبار.
c) تم السماح لمحلول الاختبار بالوقوف عند درجة حرارة الغرفة لتأكيد التفاعل.
اجمع 0.12 مل من المحلول من محلول الاختبار على فترات زمنية محددة مسبقًا (مباشرة بعد دقيقة واحدة و 5 دقائق) ،
1.08 مل من وسيط النسر المعدل من Dulbecco (وسط FBS-DMEM) الذي يحتوي على 0 ، 2٪ مصل بقري مختلطة مع تم تكرار التخفيف باستخدام وسيط FBS-DMEM بنسبة 0.2٪ عدة مرات لإنشاء سلسلة تخفيف تسلسلي 10 أضعاف. تمت إضافة تخفيفات متسلسلة بعشرة أضعاف بالتنقيط إلى كل 1 مل / بئر من الخلايا المضيفة المحضرة مسبقًا ، ثم أصيبت عند 37 درجة مئوية تحت 5Z ٪ CO لمدة ساعة واحدة.
d) بعد الإصابة بالفيروس ، تم استبدال طاف الخلية بمحلول أكسيد بنسبة 0.8٪ ، وزُرع
عند 37 درجة مئوية ، و 5٪ من ثاني أكسيد الكربون لمدة يومين. بعد التأكد بصريًا من تكوين اللويحات ، قم بتثبيت
بمحلول جلوتارالدهيد بنسبة 5 ٪ وصبغة باستخدام أزرق الميثيلين ، و
قياس عيار الإصابة بالفيروس بناءً على بيانات عدد اللوحات المتكونة.
هـ) تم إجراء هذا الاختبار مرتين ، وتم تقييم معدل تثبيط فيروس الأنفلونزا لمحلول Ruflox المخفف 2000 ضعف بناءً على متوسط قيمة المرتين.
